Wesentliche Durchflusszytometrie Methoden

Durchflusszytometrie umfasst das Prinzip der hydrodynamischen Fokussierung mit einer Lichtanregungsquellewie einen Laser , zu messen und die physikalischen Eigenschaften der einzelnen Partikel zu analysieren. Durchflusszytometrie vorwiegend Zellanalyseangewendet wird, und die Eigenschaften analysiert umfassen Zellgröße, Granularität und Fluoreszenzintensität . Wesentliche Nachweismethoden in Fluss verwendet Zytometrie gehören Vorwärtsstreulicht , Seitenstreulicht und Fluoreszenz. Durchflusszytometer

Ein Durchflusszytometer ist umfassen Fluidik, Optik und einem Elektronik -System. Der Fluidik -System ist für den Transport des Probenstroms zu dem Laserstrahl zur Abfrage verantwortlich. Das optische System enthält Laser und optische Filter, die Proben und direkte Lichtsignale zu den entsprechenden Detektoren zu beleuchten. Das detektierte Licht wird in elektronische Signale durch das elektronische System für die Interpretation durch den Computer umgewandelt .
Vorwärtsstreulicht

gebeugte Licht in Vorwärtsrichtung gestreut erkannt wird ungefähr 20 Grad von der Achse des Laserstrahls, der von einer Photodiode genannt Vorwärtsstreukanal ( FSC) . Zukunftsstreulichtist direkt proportional zur Partikeloberfläche und wird als Indikator für die Zellgröße und zwischen lebenden und toten Zellen zu unterscheiden verwendet . Aufgrund dieser Eigenschaften ist FSC Immunphänotypisierung als Auslöser der Signalverarbeitung angewendet .
Side -Streulicht

Seitenstreulichtbezieht sich auf Licht gebrochen einem zellularen Schnittstelle, die bei etwa 90 Grad von der Achse des Laserstrahls von der Seite Treukanal ( SSC) , dann zum entsprechenden Detektor von einem Strahlteiler weitergeleitet wird , gemessen . Seitenstreulicht entspricht in etwa Zell Granularität oder interne Komplexität und wird verwendet, um das körnige Inhalt der Zellen zu bestimmen . Seiten-und Vorwärtsstreulicht in Kombination verwendet werden , um zwischen verschiedenen Zelltypen unterscheiden.
Fluoreszenz

Fluoreszenz bietet sowohl quantitative als auch qualitative Informationen über intrazelluläre Moleküle wie Zytokine und DNA und Zelloberflächenrezeptoren , durch die Verwendung Fluorochrommarker und Messen bei verschiedenen Wellenlängen . Jedes Fluorochrom Label hat eine bestimmte Wellenlänge klingelte bei der Licht absorbiert das Absorptionsspektrum genannt . Fluoreszenz- Funktionen als Photon wird von einem angeregten Elektronen Anschluss an Lichtabsorption emittiert.