Wie man eine Allium Cepa -Test durchführen

Zwiebeln ( Allium cepa ) werden verwendet, um Umweltgefahren , indem es die Entwicklung Wurzeln in Kontakt mit zu testenden Substanzen kommen zu beurteilen. Nach ausreichender Belichtung werden die Wurzeln ausgezogen , gebeizt und aufgeschlossen , so dass die Zell Chromosomen unter einem Lichtmikroskop gesehen werden. Toxizität ist belegt , wenn Chromosomenanomalien oder Zellteilung Anomalien erkannt werden. Wurzelspitzen verwendet werden, da die Zellen dort aktiv wachsenden und sich teil , was eine gute Chance, um Chromosomen während der verschiedenen Phasen der Zellteilung zu sehen. Was Sie
Zwiebeln
Messer
Wasser Brauchen
Becher oder andere Behälter für Flüssigkeiten und Zwiebeln halten
Test- Flüssigkeiten
Rasierklinge oder Skalpell
Vials
Aceto - Alkohol Fixiermittel
Objektträger Deckgläser

Salzsäure
Edelstahl Einmaischen Stange
Karbolfuchsin Fleck
Aceto - Orcein Fleck
Essigsäure
Kanadabalsam
Lichtmikroskop kamera Aufsatz für Mikroskop
Weitere Anweisungen
Einrichten der Test-
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die äußere trockene Haut von 12 Zwiebeln entfernen anzeigen . Kratzen Sie die Unterseite der Zwiebel um den Bodenplatten , ohne das Gebiet, aus dem die Wurzeln entstehen.
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Wählen Bechergläser , die einen Mund weit genug zu haben , um die Unterseite der Zwiebeln in der Testeingetauchthalten Flüssigkeiten. Füllen Sie die Becher mit destilliertem Wasser und legen Sie die Zwiebeln in den Bechern in Kontakt mit dem Wasser. Schirmen Sie die Seiten der Becher mit Aluminiumfolie zu unterirdischen Dunkelheit simulieren. Wechseln Sie das Wasser täglich.
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Untersuchen Sie die Zwiebel Basen nach zwei Tagen. Wurzeln gebildet haben sollte . Bewerten Sie die Wurzelwachstum und entsorgen Sie die zwei Zwiebeln mit der schwächsten Wurzelwachstum .
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eine zweite Serie von fünf Bechergläser jeweils eine Probe des zu testenden Materials , wie Abwasser oder Industrie Abfluss Set enthalten . Legen Sie fünf der Zwiebeln in diesen Becher . Bewahren Sie die anderen fünf in destilliertem Wasser als Testkontrollen . Damit die Wurzeln für weitere 24 Stunden wachsen.
Vorbereitung der Roots
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Mit einem Skalpell oder einer Rasierklinge , Ernte fünf vor sechs Wurzelspitzen aus jeder Zwiebel, Aufnahme die Kontrollen waren und die Probanden waren . Halten Wurzeln aus einzelnen Zwiebeln getrennt in kleinen Fläschchen markiert .
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Fix Wurzelspitzen sofort in Aceto - Alkohol im Verhältnis 1:3 . Legen Sie die Wurzelspitzen für eine Zwiebel auf einem Objektträger und zerkleinern sie in 1N Salzsäure, die das gleiche wie 1 M Salzsäure bei 60 Grad Celsius drei Minuten lang ist . Stain mazerierten Spitzen mit Karbolfuchsin Fleck , einer Mischung aus Phenol und Fuchsin , die auf Elemente in Zellwände bindet , so dass sie sich unter dem Lichtmikroskop besser sichtbar.
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hinzufügen 2 Prozent Aceto - Orcein Fleck in 4 Prozent Essigsäure. Diese Farben die Chromosomen . Rühren Sie mit dem Aufweichen Stange . Tragen Sie einen Deckglas , -drücken , um die Wurzelspitzen quetschen . Entweder die Ränder mit schnell trocknenden Nagellack oder die Vorbereitungen dauerhaft montieren in Kanadabalsam , Harz aus der Balsam-Tanne Baum entweder mit ätherischen Ölen oder Xylol gemischt. Nummerieren Sie die Folien so die Ergebnisse werden aufgezeichnet, aber nicht ersichtlich , ob jeweils eine Testperson oder ein Steuer .
Aufnahmeergebnisse
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Legen Sie die Objektträger auf der Bühne eines Lichtmikroskops . Überprüfen Sie das Feld unter geringer Vergrößerung , die Umstellung auf höheren Vergrößerungen auf Chromosomen zu untersuchen.
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Notieren Sie die Chromosomenaberrationen auf einem Datenblatt , Aufzeichnung von Informationen durch die codierte Nummer für jede Zwiebel. Fügen unvollständig getrennt oder gebrochen Chromosomen , Mikrokerne (extra Kerne in der Nähe des Ende der Zellteilung die Chromosomen Reste enthalten können gebildet werden) , Chromosomenringe und klebrig und gestört Chromosomen in verschiedenen Stadien der Zellteilung. Fotografieren Sie jede Folie .
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Analysieren Sie die Daten mit Hilfe statistischer Analysen. Interpretieren Sie die Ergebnisse zu bewerten, ob die Testlösung ist genotoxisch.