zu einem normalen Bakterien färben , flüssige Beize mit dem Schieber für etwa eine Minute angelegt , dann mit Wasser abgespült. Differential -Färbung verwendet verschiedene Flecken für zwei verschiedene Bakterien in der gleichen Folie. Beispielsweise in einer Gram-Färbung, der Schieber wird zunächst mit Kristallviolett gefärbt und Jod , dann mit Alkohol entfärbt. Zellen, die Gram-positive sind die dunkel-violette Farbe der ersten Fleck , selbst nachdem der Alkohol verwendet wird behalten , während Gram- negativen Zellen werden zu farblosen zurückzukehren. Dann wird eine zweite Fleck aufgebracht wird, in einer Kontrastfarbe wie rosa, und die Gram-negativen Zellen rosa drehen, während die gram-positiven Zellen ihre ursprüngliche Fleck zu halten.
Geschichte
Einige Bakterien haben eine dicke Zellwände aus Lipiden , die Bausteine der Fette, die sie wachsartig und nahezu wasserdicht macht . Dies bedeutet eine normale Fleck kann die Zelle nicht durchdringen . In den 1880er Jahren waren die Wissenschaftler versuchen, Mycobacterium tuberculosis zu studieren , die Bakterien, die Tuberkulose verursacht. Allerdings wäre es eine reguläre Gram-Färbung nicht zu halten , wenn es in den Fleck für bis zu 24 Stunden eingetaucht . Paul Ehrlich , der später entwickelte das erste Medikament wirksam gegen Syphilis, entwickelt säurefeste Färbung , um den Fleck in die Bakterien zu zwingen. Ehrlich- Verfahren dauerte nur 45 Minuten , während die moderne säurefeste Färbetechnik dauert nur 5 Minuten.
Methode
Um den Farbstoff zu zwingen , in der Regel Karbolfuchsin , in die Bakterien , muss er über ein Becherglas mit kochendem Wasser für 5 Minuten erwärmt werden, während der Schlitten ständig mit Flecken geflutet und nicht austrocknet . Eine alternative Methode, um Wärme an modifizierten Kinyoun Karbolfuchsin Fleck , welches nicht mehr erwärmt werden verwendet , aber es ist zwingend notwendig, dass der Schlitten nicht während 5 Minuten des Eintauchens in den Fleck zu trocknen. Unabhängig davon, welche GrundfärbungMethode verwendet wird, wird der Schieber mit Säure Alkohol entfärbt - nicht regelmäßig Alkohol - und mit einem sekundären Gegenfärbung mit einer anderen Farbe , die anderen Bakterien, die vorhanden sein können, zeigen gefärbt. Bakterien , deren primäre Flecken bleiben nach Entfärben mit Säure Alkohol säurefest bezeichnet.
Organismus vorsorglich
Mycobacterium tuberculosis , ist sehr gefährlich und wird nur in Krankenhäusern untersucht und klinische Einrichtungen, die separate Räume oder speziell Transfer Hauben , um eine Kontamination zu verhindern. Es ist illegal, es in einem akademischen Labor zu verwenden. Stattdessen wird Mycobacterium smegmatis verwendet, aber es hat eine viel dünnere Zellwand als M. tuberculosis , so ist es einfacher , versehentlich über entfärben die Folie entfernen und den primären Fleck.
Verfahrensmaßnahme
Karbolfuchsin Dämpfe sind giftig , so dass beim Erhitzen von ihnen , mit einem Abzug , um die Rauchgase enthalten und Entlüftungs sie außerhalb . Auch, um die Gefahren der Heizung Folien ganz zu vermeiden , Kinyoun Karbolfuchsin können stattdessen verwendet werden , die eine höhere Konzentration an Phenol und Fuchsin , zwei Wirkstoffe in den Fleck hat , und muss nicht erwärmt , um die Bakterien zu durchdringen .
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