Konfokale Scanning-Mikroskopie wird von Forschern in der biologischen Wissenschaft und anderen Branchen verwendet werden, um ein Bild der dreidimensionalen Struktur einer Probe , wie eine Zelle oder eines Gewebes zu erhalten. Auch wird das Verfahren verwendet, um die mikroskopische Struktur einer Probe , die aus irgendeinem Grund nicht in Abschnitte geschnitten werden, vorher zu beobachten. Auch wenn diese Herausforderungen kann durch eine komplexe computerbasierte Bildverarbeitungsprogramms erfüllt werden , ist diese Methode langsam und erfordert sehr viel Rechenleistung.
Konfokale Mikroskopie vs Standard- Lichtmikroskopie
Wenn eine dicke Probe wird mit einem herkömmlichen Lichtmikroskop wird das durch die Konzentration auf eine bestimmte Ebene erhalten Bild durch verschwommen , out- of-focus Messwerte, die von den Teilen der Probe oberhalb und unterhalb liegen kommen verschlechtert der Fokusebene . Für gewöhnliche Lichtmikroskopie gut zu funktionieren , muss eine Probe in dünne Abschnitte analysiert werden in Scheiben geschnitten werden , und die Dicke der Sektion ist umgekehrt proportional zur Klarheit des Bildes . Doch möglicherweise wertvolle Informationen über die dritte Dimension verloren geht , wenn eine Probe geschnitten und , wie erwähnt, einige Proben können nicht einfach überhaupt geschnitten werden.
Wie es funktioniert
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Das konfokale Scanning-Mikroskop konzentriert sich auf einer bestimmten Ebene in eine dicke Probe bei gleichzeitiger Ablehnung Licht, das von außerhalb der Fokusregionen oberhalb und unterhalb dieser Ebene kommt . Dies führt zu einer sauberen "optischer Abschnitt ", und aus einer Folge von diesen Abschnitten in verschiedenen Tiefen genommen wird, kann ein Computerprogramm, ein dreidimensionales Bild zu rekonstruieren . Diese Strategie ist ziemlich ähnlich, was ein CAT- Scanner macht für Radiologen Untersuchung eines gesamten menschlichen Körper , da beide Methoden vorhanden saubere Schnittansichten des Inneren einer intakten Struktur
Wie es funktioniert : . Die Einzelheiten
das Gerät wird in der Regel mit Fluoreszenzoptik verwendet werden, und in jedem Augenblick Optik der Maschine konzentriert ihre Scheinwerfer auf einen einzigen Punkt in einer bestimmten Tiefe in der Probe. Eine äußerst helle punktBeleuchtungsQuellebenötigt wird, und dies wird normalerweise durch einen Laser, dessen Licht durch ein Nadelloch hindurchgeführt ist . Ein Detektor mit einer Lochblende versehen sammelt die Fluoreszenz von der Probe emittiert wird beleuchtet . Nur das Licht aus dem spezifischen Fokus-Punkt in den Detektor , und das Gerät schließt Licht aus Bereichen kommen außerhalb der Fokusebene .
Spezielle Verwendungen
Das konfokale Scanning Mikroskop wird häufig verwendet , um die Struktur der verschiedenen komplexen dreidimensionalen Gegenständen , wie beispielsweise Netze von Zytoskelett- Fasern in das Zytoplasma der Zellen , und die Anordnungen von Chromosomen und Genen in einer Zelle der Kern bei verschiedenen Punkten im Zellzyklus aufzulösen. Pollenkörner , beispielsweise eine komplexe Reliefzellwand , die nur unter Verwendung der konfokalen Mikroskopie klar gesehen werden können. Die Elektronikindustrie verwendet auch dieses Gerät und Methode zur Halbleitern zu untersuchen.
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