Das Protein Aktin ist sehr streng , oder " hoch ", während andere Organismen konserviert , aus Algen und Bakterien , um Hunde und Menschen. Es existiert als einzelne Proteineinheiten oder Monomere , die miteinander verbunden werden müssen , um die größeren , globulären Proteins bilden. Aktin- Filamente benötigt wird, um in Zellen, die für die Bewegung der Zelle als auch für die Bewegung von Organellen innerhalb der Zelle zu machen. Es ist daher wichtig für grundlegende zelluläre Prozesse wie Zellteilung und Beweglichkeit .
Forschungsbereiche Mit Actin Antikörper
Actin -Antikörper gehören zu den routinemäßig und weit gebraucht Zellbiologie -Tools. Ihre Anwendung auf Experimente mit Immunhistochemie, Western Blot , Immunpräzipitation , ELISA und Durchflusszytometrie , hat eine lange , gut dokumentierte Geschichte des Erfolgs. Die meisten Unternehmen, produzieren und verkaufen Antikörpern zu Forschungszwecken herzustellen primären Antikörper, die an einem farbigen oder fluoreszierenden Molekül verknüpft werden können , oder dass muss von einem sekundären Antikörpers , eines dieser Moleküle sichtbar verknüpft erkannt werden.
Actin Antikörper in Immunhistochemie und Immunnocytochemistry
Aktin ist ein wesentlicher Bestandteil der Messenger Ribonukleinsäure Produktion der Zelle , so dass es in der Regel in erheblichen Mengen vorhanden im Kern ist . Seine Anwesenheit hier als Positivkontrolle für IHC oder ICC- Experimente verwendet werden. Aktin ist mit Hilfe von Antikörpern , die seine Komponente Aminosäuren erkennen nachgewiesen. Die visuelle Beobachtung, dass das Actin -Antikörper erkannt wurde belegt, dass das verwendete Protokoll korrekt ausgeführt wurde oder formuliert . Die Färbung mit Aktin- Antikörper dient als Positivkontrolle für andere Antikörperfärbung auf andere Arten von Proteinen zu erkennen , entweder für die Forschung oder medizinische Diagnosen .
Aktin- Antikörper im Western Blot
Western-Blotting ist ein Verfahren zum Nachweis und zur Quantifizierung Protein mit wissenschaftlichen Verfahren wie Gel -Elektrophorese , Immunoblotting und Antikörper- Hybridisierung. Das Protein von Interesse und das Actin -Proteins durch ein Gel , das Proteine in verschiedenen Größen entlang eines Gradienten Größe trennen kann electrophoresced . Die einzelnen Proteine werden dann auf eine spezielle Membran , wo sie immobilisiert werden übertragen . Aktin -Antikörper an die Membran angelegt wird , um das immobilisierte Protein Actin erkennen , wiederum als positive Kontrolle für den Nachweis des Proteins von Interesse dient. Da eine bekannte Masse von Aktin -Protein wird in der Regel verwendet , ist es möglich, diese Zahl mit der des Proteins von Interesse zu vergleichen und bestimmen so ihre Quantität.
Actin Antikörper in Immunpräzipitation
auch, weil Aktin -Antikörper werden routinemäßig eingesetzt und so gut untersucht , ihre einzigartige Fähigkeit , sich strikt an Aktin und ihrer bekannten Größeneigenschaft binden, werden als positive Kontrollen in Immunpräzipitationsexperimenten ausgebeutet. Wechselwirkungen, die in einer Zelle auftreten, können durch Lyse der Zelle --- dessen Zerfall erleichtert --- und Sammeln des resultierenden Lysats , das im Wesentlichen ein "Suppe" von verschiedenen Proteinen untersucht werden. Durch die Bindung von Antikörpern gegen ein Protein von Interesse und Aktin , und dann die Mischung auf eine Säule ist es möglich, den Antikörper-gebundenen Protein-und Antikörper -gebundene Aktin aus anderen unerwünschten Proteinen zu reinigen. Der Nachweis von Aktin -Proteine durch die Aktin- Antikörper dient als Nachweis , dass die Immunopräzipitationsverfahren erfolgreich war.
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