Wie Vergleichen DNA-Gelelektrophorese Methoden

Gelelektrophorese ist ein Standardverfahren Trennen von DNA , RNA oder Protein durch ein Gel unter Verwendung eines elektrischen Stroms. Es nutzt die elektrische Ladung der Moleküle , um sie in einem Gel unter Verwendung eines elektrischen Stromes zu trennen. Agarose

Agarose -Gel ist die gängigste Methode zur Visualisierung von DNA. Verschiedene Prozentsätze von Agarose kann in Abhängigkeit von der Größe des zu visualisierenden DNA verwendet werden. Ein geringer Prozentsatz von Agarose, wie 0,7 Prozent hat die Auflösung auf große DNA-Fragmente zu visualisieren. Ein höherer Prozentsatz , wie beispielsweise 2 Prozent , wird oft verwendet, um kleine DNA-Fragmente zu visualisieren. Um DNA sichtbar , Ethidiumbromid wird häufig verwendet, da es interkaliert mit DNA und fluoresziert im UV-Licht .
Polyacrylamid

Polyacrylamid- Gele werden zur Trennung von DNA-Fragmenten so klein wie verwendet 10 Basenpaare bis zu 1 kb. Diese Gele haben eine kleine Trennbereich, aber mit einer hohen Auflösung . Sie sind jedoch auch komplizierter herzustellen . Es ist auch möglich , große Mengen an DNA , ohne die Auflösung zu laden. Wie bei Agarose, Ethidiumbromid wird oft verwendet, um die DNA-Fragmente sichtbar zu machen, aber Polyacrylamid können die Fluoreszenz löschen , so dass es schwierig ist, kleine Mengen an DNA zu visualisieren.
Pulse - Field Bags

Diese Form der Elektrophorese verwendet, um große DNA-Moleküle zu trennen und wird oft für die Genotypisierung verwendet . Große DNA-Fragmente wandern in einem ähnlichen Ausmaß . Es kann schwierig sein , also auf verschiedenen Bändern zu lösen. Pulsfeld - Elektrophorese wechselt das elektrische Feld . Dies ermöglicht eine bessere Trennung und Auflösung der DNA.
Capillary

Kapillarelektrophorese ist eine schnelle und sensitive Methode zur Trennung von DNA. Kleine Mengen von DNA gelöst werden können . Die DNA kann mit Fluoreszenzmarkierung oder mit UV-Licht sichtbar gemacht werden.
Denaturierung

Die Trennung der DNA kann durch seine Struktur kompliziert sein. Es ist möglich, unter Verwendung von Harnstoff und Formamid , die Struktur durch Absenken des Schmelzpunktes der DNA zu zerstören. Dies kann in beiden Agarose und Polyacrylamid- Gele verwendet werden.
Überlegungen

Die Elektrophorese -Methode ausgewählt wird von der Größe der DNA-Fragmente zu trennen abhängen. Wie die DNA wird nach der Trennung verwendet werden, bestimmen auch die letzte Methode.