Polyacrylamid-Gelelektrophorese mit dem Detergens Natriumdodecylsulfat ist eine viel verwendete Technik für kleine Trennung von Proteinen , sagt G. Brent Irvine , Forscher an der Königin University Belfast , in " Neuropeptid -Protokolle . " Techniker lösen Acrylamid in Wasser, die Lösung bei 39,2 Grad Celsius. Später Tris- Tricin- , Chlorwasserstoff , Mercaptoethanol und SDS sie hinzufügen , um das Gel zu komponieren. Molekularbiologen können diese Gel in der Elektrophorese-Vorrichtung , die speziell entwickelt, um Proteine zu trennen verwendet .
Tris- Tricin- Gel
Dieses Protokoll bezieht sich auf die Herstellung von Tris- Tricin- Gel für die Elektrophorese in der Regel Experimente nach der University of Washington. Techniker mischen Acrylamid-Lösung , Tris- Tricin , Chlor, SDS und doppelt destilliertem Wasser. Sie fügen dann Glycerin , nur das Gel zu trennen und entfernen das Gas in der Lösung unter Vakuum bis zu 15 Minuten erstellt. Sie fügen hinzu, Ammoniumpersulfat und Tetramethylethylendiamin und Schwenken vermischen . Schließlich wassergesättigten Isobutanol fügen sie auf das Gel .
Trennung von niedermolekularen Proteinen
Tris- Tricin ist eine wichtige Komponente in der Trennung Gewicht Proteine mit niedrigem Molekular , sagt Ian M. Rosenberg in " Protein-Analyse und Reinigung : . Tischtechniken " Um die Elektrophorese Tris- Tricin -Lösung herzustellen , Techniker hinzufügen TEMED , den Farbstoff Coomassie-Blau , die Gele Acrylamid und Bisacrylamid , Chlorwasserstoff , Glycerin und SDS . Die Gelierung Prozeß innerhalb einer Stunde beendet . Protein- Proben werden bei 104 Grad Celsius für 30 Minuten inkubiert , vor der Elektrophorese -Analyse.
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