CFU Protokolle

Kolonie - bildende Einheit oder CFU, ist ein Maß der Mikroorganismus Zahlen. Im Gegensatz zu anderen Methoden, wie direkte mikroskopische wo toten und lebenden Mikroorganismen berücksichtigt werden, CFU -Protokolle ermöglicht Biologen nur lebensfähige Zellen zu zählen. Standard- Maßeinheiten sind koloniebildende Einheiten pro Milliliter für Flüssigkeiten und Kolonie-bildenden Einheiten pro Gramm für Feststoffe . CFU -Protokolle sind weit verbreitet in der biotechnologischen Forschung eingesetzt. CFU- MK -Assay für akute Thrombozytopenie Protokoll

Megakariocyte oder MK, ist eine Art von Knochenmarkzellen, die Blutplättchen produziert . Dieses Protokoll wird in Studien über Thrombozytopenie , eine Bedingung zu niedrige Thrombozytenzahlenim Zusammenhang verwendet . Vor dem Zählen, hergestellt Techniker die CFU- MK -Assay mit menschlichen Nabelschnurblutzellen , Iscove modifiziertem Dulbecco- Medium , Rinderkollagenlösung, Serum -freies Medium mit Proteinen Zytokine genannt , Antikörper anti -TNP , Anti-GPIIb/IIIa und Anti - . Maus-IgG , Evans blue Gegen , Tris /NaCl-Puffer und Rinderserumalbumin
Colony Assay Mix Protokoll

Techniker bereiten diese Assays mit menschlichem Plasma , der chemischen 2 - Mercaptoethanol, Leukozyten- konditioniertes Medium , das Hormon Erythropoietin und Iscove modifiziertem Dulbecco- Medium , nach Jeffrey W. Pollard in " Basic Cell Culture Protocols ". Diese Lösung wird dann mit der Zelle zu analysierenden Proben gemischt. Methylcellulose zugegeben , und die Proben werden in einer feuchten Atmosphäre mit 5 Prozent Kohlendioxid für 14 Tage inkubiert.
Migration der CFU in CD34- Zellen

CD34 oder Cluster der Differenzierung Moleküle sind auf bestimmte menschliche Immunabwehr -Zellen vorhanden ist, wie kontrolliert Reibwert auf den Zellmembranen wirkt. Zellen , die dieses Protein enthält, kann die Fähigkeit, von einem Gewebe zum anderen migrieren. Während dieses Protokolls wird Techniker waschen Proben von CD34 migrierten Zellen cytokynes Proteine ​​zu entfernen. Die Proben werden dann zentrifugiert und in einem Medium wachsen Faktoren resuspendiert. Die Kolonien werden zwei Wochen später gezählt.