Perfusion Technik

Die Perfusion -Technik ermöglicht die schnelle und gleichmäßige Fixierung auf alle im Gewebe vorhanden einzelnen Zellen . A 4 Prozent Para Fixiermittel wird über das Gefäßsystem geleitet, um Gewebe von Interesse zu erhalten. Die Hauptzielstellefür die Arzneimittelverabreichung in einem bestimmten Organ kann mit Hilfe dieser Technik identifiziert werden. Perfusion hat auch dazu beigetragen, die Wissenschaftler , um die strukturelle und funktionelle Organisation des menschlichen Gehirns zu verstehen. Was Sie
Tier (Ratte oder Affe )
Perfusion Pumpe, Becher Brauchen
Fixativ (4 Prozent Para )
Spritze Nadeln
Perfusion Tropf
Schere
Scalpel < eingestellt br> Pinzetten
0,9 Prozent Salz
Ice Box
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frisch zubereiten 4 Prozent Para durch Mischen von 40 g Paraformaldehyd in 800 ml Wasser. Die Lösung wird auf 60 C unter Rühren . Die Lösung wird auf 4 ° C pH-Wert auf 9,5 mit Hilfe eines pH-Meters . Zur Einstellung des pH , fügen Eisessig um den gewünschten pH zu erhalten
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die Perfusionspumpe Set; . Legen alle Glasteile und Perfusion Nadel. Run 100 ml Leitungswasser durch den Schlauch der Pumpe Perfusion , um alle Rückstände aus der Glasteile zu entfernen. Legen Sie ein Becherglas mit Fixateur in einem Eis -Box.
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Öffnen Sie das Ende der Perfusion Rohr und legen Sie sie in einem Fixiermittel Becher. Skaliert das Volumen der Lösung gemäß der Größe des Tieres. Jetzt stellen Sie die Perfusionspumpe Ventil zu einem langsamen, stetigen Tropf . Schließen Sie das Ventil . Füllen Sie die Perfusion mit 0,9 Prozent ( Gewicht /Volumen) Kochsalzlösung.
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bis die Chirurgie-Instrumente in der Nähe der OP-Tisch ein. Geben eine Anästhesie Injektion an das Tier entsprechend seiner Körpergewicht ( 0,5 mg Ketamin /kg). Legen Sie das Tier auf dem Operationstisch mit dem Rücken nach unten.
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Machen Sie einen Schnitt mit dem Skalpell , die entlang der Länge des Zwerchfells. Mit den großen Scheren, stumpf Seite nach unten geschnitten das Bindegewebe an der Unterseite der Membran . Expose das Herz. Halten Sie das schlagende Herz mit der Pinzette und legen Sie eine Nadel in die linke Herzkammer .
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das Ventil der Perfusionspumpe öffnen , um den Fluss von 0,9 Prozent Salzlösung zu ermöglichen. Achten Sie darauf, die Lösung frei fließen und das Tier lebt. Das Herz des Tieres sollte kontinuierlich schlagen werden. Sobald das Blut wird durch die Salzlösung ersetzt , ändern Sie die Lösung auf 4 Prozent Para .
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Stoppen Sie die Durchblutung und sezieren ein Gewebe von Interesse . Halten Gewebe in dem gleichen Medium bei 4 ° C