Zweck der Proteinexpressionsanalyse

Die Studie von Proteinen ist ein wichtiges Verfahren in der Biologie, in beiden Diagnostik-und Forschungslabors in der Wissenschaft und in der Industrie durchgeführt. Diagnoseproteinexpressionsanalyseverwendet, um das Vorliegen von Krankheiten oder abnormalen physiologischen Bedingungen zu erfassen. In der Forschung in die Produktion von Bio -engineered Proteine ​​für weitere wissenschaftliche Studie oder in der Medikamentenentwicklung eingesetzt wird. Protein Expression

die Expression von Proteinen ist sehr einfach die Herstellung eines Proteins aus einer Aminosäuresequenz definiert , die wiederum durch eine definierte Gen-Sequenz bestimmt ist . Das Verständnis dieser Sequenzen kann ein Prüfer mit einem Protein in verschiedener Weise zu modifizieren - beispielsweise durch Anordnen einer fluoreszierenden Markierung auf dem Protein , so kann festgestellt werden , oder durch Entfernen von Teilen des Proteins, die von einer Zelle mit ihrer Herstellung oder Verarbeitung beeinträchtigen können
Methoden und Werkzeuge zur Analyse der Proteinexpression .

Protein -Expression wird durch Verwendung von hochentwickelten und spezialisierten Technologien und Verfahren , wie ELISA , Immunoassays , Massenspektrometrie analysiert , und Bildgebung. In den meisten Fällen wird das Protein indirekt nachgewiesen - beispielsweise durch Verwendung eines Antikörpers , der an bindet und dann unter Verwendung eines sekundären Detektionssystem , um es zu visualisieren. Ein basisches Protein -Nachweistechnik ist die Western-Blot , bei dem ein Protein durch ein Agarose -Gel laufen gelassen und dann auf eine Membran übertragen. Dann wird " abgetastet " , indem ein Antikörper zu binden , und der Antikörper wird dann mit einer chemischen Lösung , wie einer Silberfärbung , um ein Bild der Lage des Proteins auf dem Blot umgesetzt . Dies gibt einen Hinweis auf die Größe des Proteins und ob es als Mehrfach-oder Einzeleinheitenvorhanden ist. Eine andere häufig verwendete Methode ist die Fluoreszenzdetektion . Die Bindung eines Antikörpers mit einem fluoreszierenden Partikel an das Protein markiert wird es ermöglichen, durch Mikroskopie sichtbar gemacht werden.
Der Zweck der Analyse von Protein- Expression

Studieren die Expression eines Proteins, gibt ein Ermittler einen Hinweis , wo es produziert wird (dh seine Expressionsmuster und Lokalisierung ) oder deren Mengen (dh seine Gewebe-oder Zellebene ) . Diese Information wird in der diagnostischen Pathologie verwendet , zum Beispiel die Detektion von Protein im Urin zu bestimmen, ob ein Patient an Nierenerkrankungen wie NierenrohrSyndrom oder diabetischer Nephropathie . In genetischen Labors Genklonierung Experimente erzeugen in der Regel rekombinante ( gentechnisch veränderten) Proteinen. Die Analyse dieser synthetischen Moleküle ist wichtig bei der Überprüfung Gensequenzen oder Prüfen auf Mutationen , die möglicherweise nicht wünschenswert sein kann. Beispielsweise sind Impfstoffe Proteine ​​durch künstlich modifizierte Einheiten von Genen hergestellt . Diese Proteine ​​müssen sorgfältig analysiert werden, um sicherzustellen, dass die Gene in der richtigen und gewünschten Weise verändert wird, um unerwünschte Nebenwirkungen zu vermeiden oder toxische werden.
Protein Expression durch Western Blot Analyse
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Die Analyse der Proteinexpression mittels western Blot ist ein sehr routinemäßig durchgeführt , um Laborverfahren für Wissenschaftler , um Gen- Klonierung und rekombinante Proteinproduktion zu evaluieren. Beispielsweise in der Molekularbiologie und Gentechnik, Gene aus anderen Spezies (z. B. Maus und Mensch ) miteinander verbunden sind und in eine Bakterienzelle, die in der Lage ist, das Protein zu exprimieren, platziert . Um sicherzustellen, dass die richtige Protein erzeugt wird, ist seine Expression durch Western-Blotting analysiert werden. Western-Blot ist auch in medizinischen Pathologie verwendet werden, um den Rinderwahnsinn und HIV zu diagnostizieren.
Proteinexpressionsanalysevon Durchflusszytometrie

Durchflusszytometrie erfordert Zellen mit einem angefärbt werden Fluoreszenz-Antikörper , der an ein Protein auf der Oberfläche exprimiert , oder im Inneren einer Zelle bindet . Es wird in der Pharmaforschung zur Moleküle ( Cytokine ) , die spezifisch für eine bestimmte Gruppe von Zellen und der Zellsignalisierung und Kommunikation beteiligt finden. Dies ist wichtig, so dass die Wirkung von Drogen auf die normale Zellphysiologie und Funktion kann während der Arzneimittelentwicklung und klinischen Studien überwacht werden.