Wählen Sie Ihre Blockierungspuffer je nach der Art der ELISA Sie ausführen werden . Die Wahl der Puffer sind: allgemeine Blocker ( Säugerproteingerüst) für Sandwich- und Antigen -Down- ELISAs ; BB2 neptune Sperrung ( Nicht-Säuger- Proteingerüst ) für die Human-und Säugetierarten ELISAs ; BB3 synblocks (kleine , synthetische molekulare Gerüste ) für hochfeste Sperr ELISAs ; und BB4 phosph frei (kleine , synthetische , Phosphor - freien molekularen Gerüsten) für hohe, nicht-spezifische Enzym-markierten Konjugatbindung ELISAs . Die BB4 Puffer Blocker gezielt in Tests , die alkalische Phosphatase verwenden nützlich , chemisch behandelte oder Glasreaktionsplattenund in der Mikrofluidik , wie Immun Technologies, einem Unternehmen, das alle relevanten Testgeräteliefert berichtet .
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Bestreichen Sie die Testplatte mit Antigen ( Protein) oder den Antikörper durch Eingießen der Lösung über die Platten .
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absaugen (Entfernen) der Beschichtungslösung durch Kippen der Platte, so wird der Überschuss verworfen in einen separaten Behälter .
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Pipette 300 bis 400 Mikroliter der Blockierpuffer in jede Vertiefung der Testplatte mit einer Pipette .
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die Lösungen für rund inkubieren drei Stunden oder über Nacht bei Raumtemperatur (4 ° C) . Nach der Zelltechnologie -Unternehmen, wird die richtige Blockpuffer Ihren Reagenzien zu sparen , was wertvoll sein können, weil sie teuer sind und kann knapp werden .
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waschen überschüssiges Protein , um überschüssige Mengen entfernen dies kann die Erkennung Ihrer Zielantigen an dieser Stelle zu reduzieren, wie von Pierce Net berichtet .
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, ist die Reaktion beendet , und Sie sollten eine fertige Platte mit der richtigen Menge an Antikörper zu Antigen gebunden haben , die konsistente Ergebnisse geben wird und zur Verringerung von Platte zu Platte Variation in großen, Vergleichstests.
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im Falle eines Mikroarrays , eine erweiterte Blocklösung wie Array Es ist Blockieren Es Puffer, die speziell entwickelt wurde, um keine reaktiven Gruppen, die nach einem "print" von Substraten auf Objektträgern mit super- Epoxy-, super- super- Amin und Aldehyd unter Beibehaltung der Schärfe resultierende Signal verhindert Fluoreszenz und Erleichterung Rauschunterdrückung bleiben inaktivieren. Dieses Reagenz hat eine Haltbarkeit von einem Jahr , wenn sie richtig gespeichert werden, ist extrem rein und wird als ready-to -use -Konzentrat zur Verfügung gestellt.
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