Wie Protein Expression Messen

Proteinexpression Maßnahme kann Hinweise über die Aktivitäten der Gene im Körper zu schaffen, weil Proteine ​​als die endgültige Katalysator der Zellaktivitäten . , Nach einem Artikel in der März -Ausgabe 2010 des " LabMedicine ", Pathologen und Biologen sind jedoch noch auf Hellfeldmikroskopie oder Fluoreszenzmikroskopie als die am besten geeignete Methode zur Protein-Expression zu messen zustimmen. Whole -Slide -Hell Scannen ist nicht nur einfach zu bedienen und bietet Chromogen Stabilität , aber es kann mehr Glasobjektträger zu schützen. Was Sie brauchen
Zellgewebe
Slide
biotinylierten sekundären Antikörper
Streptavidin - Meerrettich-Peroxidase
3,3 '- Diaminobenzidin
Farbzeilenkamera
Zeigen Sie mehr Anleitung

1 Legen Sie das Zellgewebe auf einer Folie und fügen Sie einen biotinylierten sekundären Antikörper , gefolgt von einem Streptavidin - Meerrettich-Peroxidase , und warten Sie zwei Minuten.
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Gießen vier Tropfen der 3,3 '- Diaminobenzidin auf die Probe und warten Sie zwei Minuten für den braunen Fleck ganz auf die Probe zu verbreiten.
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Legen Sie ein histologischer Schnitt der Bunt Probe auf einem motorisierten Plattform in einem gut beleuchteten Raum . Die Farbzeilenkamerasorgfältig anpassen, um 20X oder 40X Vergrößerung und scannen die Probe . Richten Sie die Streifen des Bildes und komprimieren das digitale Bild in eine lesbare Dateigröße.
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Drucken der digitalen Bildanalysefür die manuelle oder füttern das Bild in Computer-Software für technologiegestützte Analyse . Beobachten des Musters der Flecken in dem Bild dargestellt. Proteinexpression sorgfältig analysiert auf der Grundlage der Muster von Flecken auf der Probe .
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Bewertung der Protein-Expression auf Tumorzellen und Stromazellen durch Untersuchung der Konzentration des Proteins auf der Zellgewebe .

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Verwenden Sie die Farbmuster , um die Proteinexpression in einer Skala von 0 bis 3 + zu quantifizieren. Verwenden Sie die Partitur HER- Score oder die Allred -Score berechnen.