Protokoll für eine DAPI -Fleck

DAPI steht für die chemische 4' -6- Diamidino -2-phenylindol , und wird verwendet, um doppelsträngige DNA zu färben. Die Verbindung bildet blau fluoreszierende Komplexe mit Kernen der Zellen und so wird häufig verwendet, um die Struktur der Zellen zu markieren. Die Art und Dichte der Färbung kann auch toten oder sterbenden Zellen zu identifizieren . Vorbereiten DAPI -Lösung

Die DAPI-Lösung muss zunächst auf eine Arbeitslösung verdünnt werden. Beispielsweise müssen 10 mg des Invitrogen DAPI Produkt mit 2 ml deionisiertem Wasser gemischt, und dann weiter verdünnt, um 300 Nano Molare Konzentration (Richtungen auf dem Produkt vorhanden sein ) mit Phosphat - gepufferter Salzlösung (PBS).

Vorbereitung der Probe

Fix die Probe gegebenenfalls auf die Art der Probe auf einen Objektträger getestet werden. In 300 Mikroliter der DAPI -Arbeitslösung zur Probe und Inkubation für 1-5 Minuten. Spülen Sie die Objektträger mit PBS .
Analysieren

mit einem Fluoreszenz- Mikroskop, um am Schlitten montierten Probe aussehen. Die DAPI - gefärbten Zellkernen kann durch eine blaue Fluoreszenz identifiziert werden.