Wie auf Agarosegelen Stain

Visualisierung von Nukleinsäure oder Protein ist bei der Durchführung Agarosegelelektrophorese . Wenn Sie ohne Färbung des Gels arbeiten, werden Sie nicht in der Lage zu sehen, wo die Probe , die Sie testen erreicht hat und damit Messungen der Molekülgröße , zum Beispiel, wird stark eingeschränkt sein. Färben Sie Ihr Gel mit einem gemeinsamen , gut erprobt Farbstoff wie Ethidiumbromid ( EtBr ), die unter ultraviolettem ( UV) Licht fluoresziert , wenn sie in DNA-oder RNA-Moleküle eingelagert . Der Farbstoff wird Ihnen bei der Durchführung Ihrer Experiment zeigt sich die Moleküle in der Probe als dunkle blaue Flecken zu unterstützen. Was Sie
Schutzhandschuhe und Schutzbrille
Agarose-Gel
Ethidiumbromid
Pipette ( Gilson für kleine Mengen)
Loading Puffer
Weitere Anweisungen
< Bedarf br> 1

Schutzhandschuhe , die dünn sind , aber Schutz tragen und lassen Sie Ihre Finger und Hände uneingeschränkte Bewegung. Verwenden Sie eine kleine Pipette etwas EtBr (oder gleichwertig Färbung) aus seinem Behälter zu ziehen.
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hinzufügen 0,5 Mikrogramm pro Milliliter des von Ihnen gewählten Fleck auf Ihrer Probe. Decken Sie die Probe und manuell mischen. Mehrere Shakes sollte ausreichend sein.
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hinzufügen eine negativ geladene Ladepuffer auf die Mischung mit einer Pipette . Dies ermöglicht die gefärbten Probe mit dem bloßen Auge gesehen werden , in natürlichem Licht und beseitigt die Notwendigkeit für teure , schädlichen UV , die sonst die Moleküle in denen Sie interessiert sind verschlechtern würde . Xylencyanol ist eine häufig verwendete Ladepuffer , aber andere sind . Stellen Sie sicher, eine Ladepuffer , der mit der gleichen Geschwindigkeit wie das Molekül die Sie messen läuft aus. Xylencyanol läuft mit der gleichen Geschwindigkeit wie DNA -Fragmente, die 5000 Basenpaare (bp) lang sind.
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mit einem sauberen Pipette , um Ihre verbesserte Probe in die Vertiefungen zu Beginn Ihrer Agarose-Gel anwenden . Das Volumen, das Sie anwenden , hängt von der Größe der Gel Kämme ( auch Dicke und Länge und Gel Dicke). Färben Sie Ihre Probe und nicht der Kontrolle, so dass Sie die Parameter, die Sie interessieren ( wie Molekulargewicht ) richtig und effektiv sind, können bestimmen.
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Alternativ führen Southern Blotting als eine Möglichkeit der Visualisierung Ihrer Probe . Transfer der DNA auf eine Nitrocellulosemembran . Expose es zu einer Hybridisierungssonde . Dies ist nicht der Färbung , als solche, sondern stellt eine geeignete Alternative, da die von Access Exzellenz beschrieben .