Die Entwicklung der Gentechnik entstanden , von der Entwicklung der Polymerase Chain Reaction , PCR oder . Diese Methode ermöglicht es den Forschern , um Kopien von kleinen Regionen eines Genoms innerhalb von Stunden zu verstärken oder zu machen. Der interessierende Bereich wird durch die Zugabe von kurzen DNA-Molekülen --- Primer , die den Anfang und das Ende der Region von Interesse entsprechen bestimmt.
PCR hat sich ein wertvolles Werkzeug in der genetischen Forschung . Amplifizieren der Region von verschiedenen Individuen stellt ein Verfahren zum Vergleich. Forensics Identifizierung verwendet derzeit 15 separate Bereiche für den Vergleich. Eine Region kann bei verschiedenen Menschen entsprechen. Allerdings sollte keine zwei Menschen alle 15 Regionen entsprechen.
Agarose -Gel-Elektrophorese
PCR ist die Methode zur Verstärkung bestimmter Anbaugebiete der DNA. Es wird jedoch kein Verfahren zur tatsächlichen Größe der Fragmente zu vergleichen. Produkte der PCR werden nach Größe unter Verwendung einer gelartigen Material namens getrennt " Agarose ". Kleinere Fragmente wandern schneller auf Agarose in Reaktion auf einen elektrischen Strom in einem Verfahren namens " Agarose-Gelelektrophorese ".
Nach der PCR -Fragmente werden auf der Agarose und wandern entlang dem Gel , wenn ein elektrischer Strom angelegt wird. Ethidiumbromid ermöglicht Fragmente , wenn sie unter UV-Licht zu sehen. Agarose -Gel-Elektrophorese ist ein Verfahren zur schnellen Bestimmung der erfolgreichen PCR sowie Fragmentgröße annähert . Jedoch ist der Nachteil der Agarose als Werkzeug zur Genotypisierung , dass Fragmente muss in der Größe wesentlich für genaue Ergebnisse . Agarose nicht ein gutes Medium für den Vergleich bieten verschiedene Fragmente von einer einzigen Basis .
Automatisierte Sequenzer und Genetic Analyzers
fluoreszenzmarkierten DNA-Fragmente von einem automatischen Sequenzer aufgezeichnet .
Automatisierte Sequenzern und genetische Analysatoren sind das wichtigste Instrument in Genotypisierung eingesetzt zu werden. Diese ermöglichen Fragmente , verschiedene von einem einzigen stickstoffhaltigen Base , schnell und kostengünstig ermittelt werden. Als mit Agarose-Gelelektrophorese werden DNA-Fragmente zunächst durch PCR amplifiziert. Allerdings wird ein Primer mit einem Fluoreszenzfarbstoff Farbe in dem Fragment markiert . Proben werden nach der Größe durch die Migration durch eine gelartige Polymer in Abhängigkeit von einem elektrischen Strom getrennt. Kleinere Fragmente bewegen sich schneller als größere Fragmente . Die Fragmente wandern in Richtung des Endes des Polymers , eine digitale Kamera die Farbe und sendet die Information an einen Computer zur Analyse. Automatisierte Sequenzierung Ausrüstung wird derzeit in der forensischen Identifikation und Vaterschaftstests verwendet .
Next Generation Sequencer auch fest, Genotypen
Next Generation-Sequencing- Instrumente haben sich schnell in die seit 2006 entstanden . Diese Technologie verbindet die PCR-Amplifikation und Sequenzierung zusammen , um Millionen von Basen auf einen Zeitpunkt zu bestimmen. Der Prozess beginnt mit PCR; sind jedoch verschiedene Primer , um Perlen in einer Reaktion und dass Tausende von Regionen , die gleichzeitig verstärkt werden gemischt gebunden.
Next Generation Sequencer dann trennen die Fragmente nach Größe und erlauben eine Vielzahl von DNA-Regionen analysiert werden. Das Verfahren ist nachteilig, als Genotypisierung Werkzeug, wenn Forscher interessiert Vergleich einer einzelnen Region des Genoms sind . Der Vorteil ist , dass das Genom aus einer Einzelzelle isoliert bietet genug Material für die PCR-Amplifikation . Im Vergleich der Genotypen der normalen und anormalen Zellen von einem einzelnen Individuum isoliert kann helfen, Krebszellen zu identifizieren und mögliche Behandlungen .
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