Genetische Protokolle

Genomic DNA liefert die Blaupause für die Zellen in lebenden Organismen zu organisieren. DNA besteht aus vier sich wiederholenden Stickstoffbasen genannt Adenin, Guanin, Cytosin und Thymin . Forscher haben erfolgreich die gesamte Basensequenz , die das Genom für viele komplexe Organismen einschließlich des Menschen bestimmt. Es gibt viele wichtige Gründe, um ein Genom zu sequenzieren. Medizinische Genetik mit Entdeckung genetischer Anomalien verursacht betreffenden Krankheiten wie Diabetes , Alzheimer und Krebs. Evolutionsgenetikervergleichen Genome verwandter Arten , um genaue Taxonomie zu entwickeln. Grund genetische Protokolle in der Forschung sind die gleichen, egal, der Zweck der Forschung. Isolierung von DNA aus Zellen

Genetische Forschung erfordert Extraktion eines reinen DNA-Probe von Zellen . Eine grundlegende Protokoll beginnt mit der Unterbrechung und Entfernen von Schutz pflanzlichen Zellwände oder tierischen Zellmembranen mit einem Enzym namens Lysozym . Nicht-genetischen Zellbestandteile in Form von Niederschlägen durch schnelle Spinn mit einer Zentrifuge entfernt, während DNA in Lösung bleibt . DNA wird dann in Gegenwart von Natrium- Acetat-Salz wird mit Ethanol gefällt . Schluss Zentrifugation Niederschläge und Pellets rein genetisches Material für Forschungszwecke.
Polymerase Chain Reaction

Genetische Forschung erfordert ausreichend Kopien der DNA-Bereiche angegeben . Die Polymerasekettenreaktion oder PCR ist ein Verfahren zur Herstellung exponentiell Kopien der DNA. Das Protokoll erfordert gereinigte DNA , Taq-Polymerase , Basen genannt Desoxynukleotiden und kleine DNA-Stränge zu grundieren dem bezeichneten Gebiet . Die Reaktionsmischung wird in einem Thermocycler , einem Instrument, das eine schnelle Temperaturänderungen gegeben. Erhitzen der Mischung auf 95 Grad Celsius trennt doppelsträngige DNA , dann auf 48 Grad abgekühlt, um Primer zu sitzen, oder Glühen , um zusammenpassende Basen. Die Temperatur wird auf 72 Grad erhöht, wenn Taq-Polymerase baut Desoxynukleotiden , genannt Verlängerung , in eine neue Kopie der DNA.
Genetische DNA-Sequenzierung
Sequencing Daten erscheinen als farbige Bands bezeichnen DNA-Basen .

Automatisierte Sequenzierung wird verwendet, um genaue Basensequenz zu bestimmen und vergleichen Sie normal mit abnormen DNA. Das Protokoll fügt Fluoreszenz-markierten Didesoxynucleotide oder ddNTPs zu normalen PCR-Reaktionen , die zufällig stoppt Verlängerung von DNA-Fragmenten . Die Produkte sind durch verschiedene DNA-Fragmente eine einzelne Base . Jeder Basistyp hat eine andere Farbe. Die Endprodukte werden auf einem automatischen Sequenzer , ein Gerät zur Fragmente nach Größe getrennt auf einem Polymer mit elektrischem Strom geladen. Wenn die Bruchstücke erreichen die Polymer -Endpunkt , eine digitale Kamera zeichnet die Grundfarbe und sendet die Daten an den Computer für die Analyse.
Genotypisierung und DNA- Fingerprinting
DNA-Fingerprinting wird verwendet, um menschliche identifizieren bleibt .

Genotypisierung ist eine Methode, die kleine Segmente eines Genoms von einem Organismus im Vergleich zu einem anderen. Das Ziel ist, kleine Unterschiede in der PCR-Fragment der Größe von normalen oder zufälligen Basenänderungen in der DNA resultierende erfassen. Die Protokoll-Design beginnt mit der Grund PCR unter Verwendung eines Fluoreszenz-markierten Primer für den Nachweis auf automatisierten Sequenzer . Markierten Produkte werden nach Größe von digitalen Kamera an einen Computer zur Analyse getrennt und aufgezeichnet. Genotypisierung Protokolle für forensische Identifizierung, DNA-Fingerprinting und Vaterschaft oder die Identifizierung von genetischen Anomalien, die in Folge Krankheit entwickelt .