Warum wird beim TCA-Lipidperoxidationstest eine Zerkleinerung durchgeführt?

Beim Thiobarbitursäure-reaktiven Substanzen (TBARS)-Test zur Lipidperoxidation wird die Gewebeprobe aus mehreren Gründen zerkleinert:

Um die Homogenisierung zu erleichtern:Das Zerkleinern der Gewebeprobe hilft dabei, die Zellstrukturen aufzubrechen und die Lipide in das umgebende Medium freizusetzen. Dieser Homogenisierungsprozess stellt sicher, dass die Lipide gleichmäßig verteilt und für die Reaktion mit Thiobarbitursäure (TBA) zugänglich sind.

Zur Verbesserung der Lipidextraktion:Durch das Zerkleinern der Gewebeprobe wird die Oberfläche der Lipide vergrößert, was eine bessere Extraktion in das im TBARS-Assay verwendete organische Lösungsmittel (normalerweise eine Mischung aus Chloroform und Methanol) ermöglicht. Dieser Schritt ist entscheidend, um die Lipide von anderen Zellbestandteilen zu isolieren und ihre Reaktion mit TBA zu erleichtern.

Zur Freisetzung von Lipidperoxidationsprodukten:Das Zerkleinern der Gewebeprobe kann dabei helfen, Lipidperoxidationsprodukte wie Malondialdehyd (MDA) freizusetzen, die oft an zelluläre Proteine ​​oder andere Makromoleküle gebunden sind. Durch das Aufbrechen dieser Bindungen ermöglicht das Zerkleinern die Freisetzung und anschließende Quantifizierung von MDA und anderen TBARS.

Durch das Zerkleinern der Gewebeprobe werden die Homogenisierung, Lipidextraktion und Freisetzung von Lipidperoxidationsprodukten optimiert, was zu genaueren und zuverlässigeren Messungen der Lipidperoxidation im TBARS-Assay führt.