Der Barfoed-Test unterscheidet Monosaccharide mit einer freien Aldehydgruppe von Monosacchariden mit einer potenziellen Aldehydgruppe oder von Disacchariden. Beim Erhitzen in Gegenwart von Barfoeds Reagenz, einer mit Essigsäure alkalisch gemachten Kupferacetatlösung, erzeugen Monosaccharide mit einer freien Aldehydgruppe einen roten Niederschlag aus Kupferoxid, was auf eine positive Reaktion hinweist. Disaccharide wie Laktose haben keine freie Aldehydgruppe, daher reagieren sie negativ und erzeugen keinen roten Niederschlag.