Wie Katalase Konzentrationen messen

Katalase ist ein biologischer (Bio) -Katalysator. Dieses Enzym ist eines der wirksamsten Katalysatoren bekannt und hat positive Auswirkungen auf den menschlichen Körper und ist entscheidend für die Lebensdauer. Katalase als Katalysator zur Beschleunigung der Abbau von Wasserstoffperoxid. Wasserstoffperoxid ist ein Stoffwechselnebenprodukt , das giftig ist , wenn die Zellen nicht entfernt. Katalase unterstützt den Abbau von Wasserstoffperoxid in Wasser und Sauerstoff . Katalase hilft auch bei der Oxidation andere Toxine wie Phenole, Ameisensäure, Formaldehyd und Alkoholen. Was Sie
Zwei 110 ml Chromogen in Phosphatpuffer Brauchen
300 ul Substrat - 30% Wasserstoffperoxid
400 μL.HRP - Meerrettich-Peroxidase in Phosphatpuffer
60 ml Phosphat Puffer und
250 ml Probenverdünnungsmittel Tensid in Phosphatpuffer
Zwei 30 ml SubstratverdünnungsmittelPhosphatpuffer
Zwei 30 ml Stopp-Reagenz - Natriumazid
Zwei Fläschchen 160 U /Fläschchen Standard Katalase
Spektralphotometer
10 l verstellbare Pipetten
1 cm Weglänge spektrophotometrische Küvetten
1,5 ml Polypropylen- Röhrchen mit Kappe
Reagenzgläser - 12x75 Millimeter (2,5 ml jeweils )
Timer
VE- Wasser

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die Aktie von Katalase , dass Sie werden Mess Bereiten durch Zugabe von 200 Mikroliter ( ul) VE-Wasser auf die Konzentrationen Katalase in 50 Milliliter ( ml) Fläschchen . Die Höhe der catalese Konzentration sollte 160 Einheiten pro Milliliter (U /ml ) liegen.
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30 ul verdünnt Katalase hinzufügen zu Rohren . Gib 500 ul Substrat ( Wasserstoffperoxid - 10mm H2O2) in jedes Röhrchen . Achten Sie darauf, um das Wasserstoffperoxid zu spritzen , wenn Sie mit ihm .
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jedes einzelne Rohr für eine Minute bei Raumtemperatur inkubiert .
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hinzufügen 500 & mu , L Reagenz in jedes Fläschchen . Cap jedes Fläschchen und mischen durch Umdrehen der Flasche auf und ab. Die Mischung wirbeln Sie nicht , schütteln Sie das Fläschchen oder rühren Sie es mit einem Objekt .
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in die Reagenzgläser hinzufügen 20 ul jeder Reaktionsgemisches. In 2 ml des HRP -Reagenz in jedes Reagenzglas. Auch hier mischen die Lösung durch mehrmals invertiert die Reagenzgläser.
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die Lösung wieder inkubieren , dieses Mal für 10 Minuten bei Raumtemperatur .
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Die Absorption Pegel der Lösung mit einem Spektrophotometer . Die Spektralphotometer misst die Lichtwellenlängen, um festzustellen , was genau Substanzen vorkommen und was Konzentrationen . Diese Methode wird eine genaue Messung von Konzentrationen der Katalase zu liefern. Die Informationen in Zusammenhang mit der Interaktion von Katalase mit Wasserstoffperoxid nützlich , wie in diesem Experiment , und wie in den menschlichen Körper erfolgt selbstverständlich .