Beschreibung eines Tuberkulose Gram Stain

Tuberkulose ist eine Infektionskrankheit , die durch Mycobacterium tuberculosis verursacht . Tuberkulose ist eine Atemwegserkrankung , gekennzeichnet durch Formationen tubercules , Nekrose , Abszesse , Fibrose und Verkalkung in der Lunge. Es kann auch infizieren die Nieren , Lymphknoten , Knochen, Gelenke und skin.Primary Labordiagnose von Mycobacterium tuberculosis beinhaltet Färbung , um die Bakterien unter dem Mikroskop sichtbar zu machen. Die Probe der Wahl ist Sputum oder BAL , um eine Infektion der Atemwege oder eine tatsächliche Gewebeprobe zu identifizieren. Physiologie

Mycobacterium tuberculosis ist ein stabförmiges ( Bazillen ) , unbewegliche , nicht sporenbild , obligat aerob . Sie messen 0.4x3 Mikrometern Länge . Mycobacterium tuberculosis erfährt binäre Spaltung ( Fortpflanzungs Zellteilung ) alle 15 bis 24 Stunden, die im Vergleich zu anderen Bakterien langsam ist. Aus diesem Grund kann das Mycobacterium bis zu neun Wochen, um auf Kulturmedien erscheinen .

Mycobacterium tuberculosis empfindlich gegen UV- Licht und Wärme (z. B. Pasteurisierung ), aber resistent gegen chemische Desinfektionsmittel ist .

Gram Stain

Mycobacterium tuberculosis kann nicht wirklich als gram-positive eingestuft werden oder gram-negative . Das Gramm Klassifizierung basiert auf der Menge an Peptidoglycan der Zellwandeines Bakteriums basiert. Ein grampositiven Bakterium hat eine dicke Schicht Peptidoglykan (ca. 90 Prozent), während ein gram-negatives Bakterium hat eine dünne Schicht Peptidoglykan (5-20 Prozent). Die gram -Farbstoffe dringen in die Zellwand und mit den chemischen Komponenten in der Zellwand binden. Die gefärbten Bakterien unter dem Mikroskop lila oder pink angezeigt.

Mit Mycobacterium tuberculosis, ist die Zellwand von Peptidoglycan sondern auch komplexe Lipide, die Gramm Farbstoff Eindringen hemmen zusammen. Die Zellwand widersteht auch Entfärbung durch Säure oder Alkohol, so das Mycobacterium werden als " säurefest ". Die Zellwand Lipide sind Mycolsäure , Cord -Faktor und Wachs -D. Wenn die Bakterien waren angefärbt werden , würden die Bakterienzellen schwach gram-positive oder blass mit sehr wenig Farbe erscheinen .

Um die Bakterien sichtbar zu machen, müssen spezielle Flecken wie der Aumarine Fleck oder der Zhiel - Neelson Fleck sein durchgeführt.
Auramin - Rhodamin -Färbung

Auramin - Rhodamin- Verfahren verwendet eine gelb fluoreszierenden Farbstoff zu Mycobacterium tuberculosis unter einem Fluoreszenzmikroskop sichtbar zu machen. Kaliumpermanganat oder Acridinorange als Gegenfärbung verwendet werden. Unter der Linse werden die Bakterienzellen grün angezeigt.

Auramin - Rhodamin- Färbung ist empfindlicher als der Zhiel - Neelson und kostengünstiger.
Ziehl- Neelson Fleck

Die Ziehl- Neelson Fleck stammt von Wissenschaftlern Franz Ziehl und Friedrich Neelsen . Es nutzt beheizten Karbol Fuchsin , hohe Konzentration Säure - Alkohol und eine Gegenfärbung wie Malachitgrün oder Methylenblau . Unter dem Fluoreszenzmikroskop werden die Bakterienzellen leuchtend rosa erscheinen .

Die Ziehl- Neelson ist der Goldstandard für die primäre Identifizierung von Mycobacterium tuberculosis und Mycobacterium leprae .
Agar

Sekundär , um die Identifizierung Mikroskopie , müssen Mycobacterium tuberculosis auf besondere Kultur -Agar gezüchtet werden. Löwenstein -Jensen -Agar hat komplexe organische Substanzen (z. B. Ei, Kartoffel) , Salze, Glycerin und Malachitgrün ( hemmt andere Bakterien ) . Antibiotika zugesetzt werden, um verunreinigende Bakterien weiter zu hemmen. Die Probe wird auf diesem Agar gelegt , und die Bakterien wachsen in drei bis neun Wochen .

Eine Kulturlösung von Nährstoffen , wie Albumin und Biotin verwendet werden, um das Wachstum von selbst die kleinste Menge der Zielbakterien zu unterstützen . Dies wird als Middlebrook 7H9 (oder 7H12 )-Medium bekannt.

Die Kolonien werden als kleine, buffed , hellbraune Kolonien auf beide angezeigt.

Mit moderner Technik können jetzt mit Mycobacterium tuberculosis gezüchtet werden eine automatisierte Lesegerät. Eine flüssige Lösung von Middlebrook 7H9- Medium und einem Fluoreszenzindikator -Verbindung verwendet wird , um das Wachstum überwachen und positive oder negative Infektion.