Die TMRE Protokoll

Tetramethylrhodamine Ethyl ( TMRE ) ist eine " langsame , lipophilen , kationischen fluoreszierenden Farbstoff reditribution " in der MitoPT ™ TMRE /TMRM mitochondrialen Membranpotentials Bewertung Satz, durch Immunchemie Technologies, LLC hergestellt verwendet . Das Verfahren hilft, eine Transmembran elektrische Potentialgefälle in Zellen anzuzeigen. Vorbereiten der Assay

Das Protokoll ist einfach zu folgen , und dauert ca. 20 Minuten, um bei 37 Grad Celsius zu verarbeiten. Die lebenden Zellen im Assay verwendet wird, kann zwischen einigen Stunden und mehreren Tagen dauern, bis für den Einsatz vorzubereiten. Die Kontrollzellen kann mehrere Stunden
Protocol Teil 1

Kultur -Zellen auf eine Dichte optimal für Apoptose oder nehmen Sie zur Vorbereitung, als sie benötigen, um induzierte Apoptose zu unterziehen. oxidativen Stress Induktion, nach Ihren spezifischen Induktion Protokoll , aber nicht mehr als 10 (6) Zellen /ml.
Protokoll Teil 2

Gleichzeitig Zeit , der Kultur eine nicht-induzierten negativen Kontrollzellpopulation(bei ​​gleicher Dichte wie die induzierte Bevölkerung.
Protocol Teil 3

Apoptose induzieren oder absichtlich depolarisieren die Mitochondrien folgenden Ihre gewünschte Protokoll .
Protocol Teil 4

Bereiten 1X Assay /Waschpuffer .
Protocol Teile 5 bis 8

bereiten Sie die 1 mM oder 0,2 mM MitoPT ™ TMRE /TMRM Lager. für Protocol Teil 6 , bereiten eine 1:100 Verdünnung der 1 mM oder eine 1:20-Verdünnung der 0,2 mM MitoPT ™ TMRE /TMRM Lösung für Spick in Zellkulturproben .

Protocol Teil 7 , Flecken Zellen unter Verwendung einer endgültigen Konzentration von 20-200 nM MitoPT ™ TMRE /TMRM Lösung .

Protocol Teil 8 , analysieren die Daten.